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标准菌株中的溶源性细菌鉴定方法如何

作者: 发布于:2017-11-20 16:14:37 点击量:

标准菌株目前所包含的菌株种类比较多,而且用途也比其他细菌品种多很多,鉴于它的这一个特点,我们就来给大家做一下这种微生物菌株品种的鉴定方法介绍,希望大家对它有个全面的认识。这次我们主要介绍的是标准菌株中的溶源性细菌,因为它的普及比较广,研究意义比较大,所以先给大家做一下介绍。

1.溶源菌培养 将经LB斜面活化的大肠杆菌225(λ),接种于装有20mlLB培养液的250ml三角瓶内,30℃振荡培养16h,再从中取2ml菌悬液接入另装有20ml LB培养液的250ml三角瓶内,37℃振荡培养2h至对数期。

2.排除游离噬菌体 如待检菌株为芽孢杆菌,可先制成孢子悬液,再经80℃ 10min处理,杀死溶源菌表面可能吸附的及游        离的噬菌体;如待检菌抹为非芽孢杆菌,可利用噬菌体制备的抗血清或0.2%柠檬酸钠溶液洗涤对数期溶源菌细胞,除去表面吸附的及游离的噬菌体。然后经4000r/min离心10min,上清液可加人敏感指示菌做双层平板测定,用于检验样品屮足孖钌游离的噬菌体及吸附「溶源菌表曲的噬菌体,离心后的菌体细胞进行诱导处理。

3.诱导溶源菌 离心后收集的菌体用无菌生理盐水洗涤两次,用生理盐水或100mmol/l Tris-HCL缓冲液(pH7.0)制成终浓度为1011个/ml细胞的菌悬液,每皿加5ml菌悬液,经紫外灯30W,距离30cm、照射30s,立即加入5ml双倍浓度的LB培养液,混匀后37℃黑暗中培养2h。

4,溶源性菌株检查 按双层琼脂法操作,取上述诱导裂解液加入几滴氯仿,以10倍稀释法适当稀释,选择后3个稀释度的稀释液,毎个稀释液取0.3ml与0.2ml对数期敏感大肠杆菌226菌悬液混匀,再加入融化后冷却至45℃的LB半体培养基,立即混匀,随即倾入LB固体培养基平板上,待凝固后,37℃培养6h观察。经过培养的平板如果有大量噬菌斑出现就证明被检菌株是溶源菌。

以上几项都是我们标准菌株研发人员在长期的工作过程中所总结的关于溶原性细菌的鉴定方法介绍,希望大家可以多了解一下,看完以后有不清楚的地方可以和我们共同探讨一下。我们公司目前产品有新一代成品培养基、3分钟培养基、菌种、定量菌种、菌株、物表擦拭采样管、病毒采样管等微生物检测产品,未来还有更多标准菌株研发出来介绍给大家。




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